近日,中国科学院水生生物研究所向我司提供一台超声波发生器,可以用于湖泊水体富营养化的改善,我司实验室为验证超声波是否对藻类有去除效果,进行验证。由于超声波发生器过大,不适用于实验室实验,改用超声波清洗机,进行初步的实验。
实验主要是依据特定频率的超声波所产生的震荡波,作用于水藻的外壁并使之破裂、死亡,以达到消灭水藻平衡水环境生态的目的。
一、实验用品:加勒比单针藻、180w、40kHz超声波清洗机、烧杯、凤凰光学显微镜、血球计数版、盖玻片。
二、实验步骤:首先用500ml烧杯取加勒比单针藻液,置于超声仪中分别超声40s、1min、3min、5min、7min、9min,超声结束的藻液倒入聚乙烯瓶保存,采用血球计数法对原藻液和不同超声时间的藻液进行计数,计数步骤如下:
①取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片;
②用20μl移液器吸取鲁哥氏固定液固定过的藻液(如果浓度过高,进行稀释),从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴;
③静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜下。
④在下图中的区域(25个中格选5个区域)进行计数。
⑤实验中每个样品观测3次,取平均值。
根据如下公式进行计算:细胞数(ml)稀释倍数。
三、部分实验图片:
四、部分实验数据:
根据40s—9min超声藻液细胞数的计数,计算出去除率,制作曲线,去图所示:
由图可知,180w、40kHz超声波清洗机在40s前对藻样没有明显影响,40s后去除率呈稳定上升趋势,得知,超声波对单针藻有一定的破碎和去除效果。
湖泊、水库是我国重要的淡水资源,近20年来经济的高速发展和不适当的水资源开发利用,使淡水资源受到不同程度的污染从而导致水体富营养化。而水藻细胞壁会在特殊频率的超声振荡下破裂,藻细胞随之死亡,以达到平衡水体生态环境的目的。使藻体的细胞壁、气胞和活性酶得到破坏是超声波抑藻杀藻的主要机理。在一定频率时成为空化泡而破裂,使细胞的生理生化活性受到影响。从而缓解因水体富营养化带来的水资源问题。
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